IUBio Biosequences .. Software .. Molbio soft .. Network News .. FTP

<span style="font-weight: bold;">PLEASE, I NEED CONVERT GLYCERIN TO METANOL; IF ANYWHERE HAVE A WAY PLEASE SEND INFORMATION.<br>REGARDS<br>C. I. Hassun<br></span><br><div><span class="gmail_quote">2007/9/5, Wang, Xin-Xiang &lt;
<a href="mailto:WangXX@medimmune.com">WangXX@medimmune.com</a>&gt;:</span><blockquote class="gmail_quote" style="border-left: 1px solid rgb(204, 204, 204); margin: 0pt 0pt 0pt 0.8ex; padding-left: 1ex;">Hello Kerry,<br><br>
I used to induce yeast for GFP expression, also using Gal promoter.&nbsp;&nbsp;I noticed the trace amount of repressing medium (raffinose in your case or glucose in my case) was essential for GFP induction.&nbsp;&nbsp;If I washed the trace amount of repressing medium away with induction medium, GFP was not induced in even a week!&nbsp;&nbsp;But with the trace amount of glucose medium in, induction took only 15 hours (not test shorter time).
<br><br>Did you wash away the raffinose medium before induction or not? Good luck!<br><br>Xinxiang<br><br>________________________________<br><br>From: <a href="mailto:yeast-bounces@oat.bio.indiana.edu">yeast-bounces@oat.bio.indiana.edu
</a> on behalf of <a href="mailto:yeast-request@oat.bio.indiana.edu">yeast-request@oat.bio.indiana.edu</a><br>Sent: Wed 9/5/2007 1:02 PM<br>To: <a href="mailto:yeast@magpie.bio.indiana.edu">yeast@magpie.bio.indiana.edu</a>
<br>Subject: Yeast Digest, Vol 28, Issue 2<br><br><br><br>Send Yeast mailing list submissions to<br>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;<a href="mailto:yeast@net.bio.net">yeast@net.bio.net</a><br><br>To subscribe or unsubscribe via the World Wide Web, visit
<br>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;<a href="http://www.bio.net/biomail/listinfo/yeast">http://www.bio.net/biomail/listinfo/yeast</a><br>or, via email, send a message with subject or body &#39;help&#39; to<br>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;<a href="mailto:yeast-request@net.bio.net">
yeast-request@net.bio.net</a><br><br>You can reach the person managing the list at<br>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;<a href="mailto:yeast-owner@net.bio.net">yeast-owner@net.bio.net</a><br><br>When replying, please edit your Subject line so it is more specific
<br>than &quot;Re: Contents of Yeast digest...&quot;<br><br><br>Today&#39;s Topics<br><br>&nbsp;&nbsp; 1. Slow galactose induction (Kerry Geiler)<br>&nbsp;&nbsp; 2. RE: Slow galactose induction (Z.J. Zhang)<br><br><br>----------------------------------------------------------------------
<br><br>Message: 1<br>Date: Tue, 4 Sep 2007 13:54:57 -0400<br>From: &quot;Kerry Geiler&quot; &lt;<a href="mailto:kgeiler@gmail.com">kgeiler@gmail.com</a>&gt;<br>Subject: [Yeast] Slow galactose induction<br>To: <a href="mailto:yeast@magpie.bio.indiana.edu">
yeast@magpie.bio.indiana.edu</a><br>Message-ID:<br>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&lt;<a href="mailto:3fa3f1ca0709041054o692505aek8f75bbd8b3d1d072@mail.gmail.com">3fa3f1ca0709041054o692505aek8f75bbd8b3d1d072@mail.gmail.com</a>&gt;<br>Content-Type: text/plain; charset=ISO-8859-1
<br><br>Hi,<br><br>I am looking for suggestions as to why my galactose induction process<br>takes 6 hours.&nbsp;&nbsp;I am expressing CFP under a gal promoter in media with<br>no glucose and 2% galactose.&nbsp;&nbsp;I am getting fluorescence, but it takes
<br>6 hours to see it.&nbsp;&nbsp;Any ideas why induction could be taking so long?<br><br>I grow the cells up in media containing no glucose (2%raffinose)<br>overnight.&nbsp;&nbsp;Then I induce 150uL of this culture with 2% galactose and<br>
measure fluorescence every 15 minutes.&nbsp;&nbsp;I do not see fluorescence<br>distinguishable from background until about 6 hours later.<br><br>Thanks very much for any suggestions!&nbsp;&nbsp;Please reply to <a href="mailto:kgeiler@gmail.com">
kgeiler@gmail.com</a>.<br>Thanks,<br>Kerry<br><br><br><br>------------------------------<br><br>Message: 2<br>Date: Tue, 4 Sep 2007 15:27:43 -0600<br>From: &quot;Z.J. Zhang&quot; &lt;<a href="mailto:ZZhang@uwyo.edu">ZZhang@uwyo.edu
</a>&gt;<br>Subject: RE: [Yeast] Slow galactose induction<br>To: &quot;Kerry Geiler&quot; &lt;<a href="mailto:kgeiler@gmail.com">kgeiler@gmail.com</a>&gt;, &lt;<a href="mailto:yeast@magpie.bio.indiana.edu">yeast@magpie.bio.indiana.edu
</a>&gt;<br>Message-ID:<br>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&lt;<a href="mailto:C9C1AF307F12AF4087DEF87CB0E6A4AD01A3881F@TELEGRAPH5.uwyo.edu">C9C1AF307F12AF4087DEF87CB0E6A4AD01A3881F@TELEGRAPH5.uwyo.edu</a>&gt;<br>Content-Type: text/plain;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; charset=&quot;US-ASCII&quot;
<br><br>Kerry:<br><br>One possibility is the slow maturation of your CFP protein, rather than<br>slow induction.<br><br>Depending on the version of the CFP, and where the CFP is tagged, it<br>could take hour(s) to mature.
<br><br>Zhaojie<br><br>Zhaojie Zhang, Ph.D.<br>Director, Microscopy Core Facility<br>Department of Zoology and Physiology<br>University of Wyoming<br>Laramie, WY 82071<br>TEL: 307-766-3038<br>FAX: 307-766-5625<br><a href="mailto:zzhang@uwyo.edu">
zzhang@uwyo.edu</a><br><a href="http://www.uwyo.edu/microscopy">http://www.uwyo.edu/microscopy</a><br><br><br><br>_______________________________________________<br>Yeast mailing list<br><a href="mailto:Yeast@net.bio.net">
Yeast@net.bio.net</a><br><a href="http://www.bio.net/biomail/listinfo/yeast">http://www.bio.net/biomail/listinfo/yeast</a><br></blockquote></div><br>

Send comments to us at biosci-help [At] net.bio.net